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電穿孔是功能強大地將核酸、蛋白及其它分子導(dǎo)入多種細胞的高效技術(shù)。通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質(zhì)中的外源分子。這種技術(shù)可以將核苷酸、DNA 與 RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導(dǎo)入原核和真核細胞內(nèi)。相對其它物理和化學(xué)轉(zhuǎn)化方法,電轉(zhuǎn)化是一種有價值和有效的替代方法。
Gene Pulser Xcell電穿孔系統(tǒng)介紹
Gene Pulser Xcell電穿孔系統(tǒng)能夠生成指數(shù)波和方波,使您能夠根據(jù)自己的細胞選擇最佳波形和程序。指數(shù)衰減波和方波都已經(jīng)有效的運用于電穿孔。根據(jù)不同的細胞,選擇合適的波形可以得到很好的轉(zhuǎn)化效率。電融合( Electrofusion )對于 Gene Pulser? 系統(tǒng)也是可行的。
Gene Pulser Xcell 電穿孔系統(tǒng)采用模塊化設(shè)計的思路,可以轉(zhuǎn)化任何一種細胞,全系統(tǒng)由主單元、ShockPod? 電擊杯槽以及 CE 模塊和 PC 模塊組成,用戶可根據(jù)具體細胞的種類選擇 CE 和 PC 模塊。
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性能與優(yōu)點
● 通用性 — 可轉(zhuǎn)化所有類型的細胞,從原代細胞、干細胞到細菌、真菌皆可
● 預(yù)設(shè)程序 — 針對常用的哺乳動物細胞、細菌等的優(yōu)化程序
● 編程靈活 — 包括人工操作、預(yù)設(shè)程序、優(yōu)化編程等多種方式
● 程序文庫 — 提供多種原代細胞、細菌的電穿孔程序
● 數(shù)據(jù)管理 — 可存儲與召回前 100 個實驗的具體脈沖參數(shù)
● 重復(fù)性好 — PulserTrac? 電路和電弧保護設(shè)計,確保實驗結(jié)果的可重復(fù)性
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Gene Pulser Xcell 系統(tǒng)選擇指南
完全系統(tǒng)包括主單元、PC 模塊、CE 模塊和 ShockPod 電擊槽,可使用指數(shù)波或方波脈沖轉(zhuǎn)化真核與原核細胞。
真核系統(tǒng)由主單元、CE 模塊和 ShockPod 電擊槽組成,可電轉(zhuǎn)化哺乳動物細胞和植物原生質(zhì)體。CE 模塊提供了一種通過增加脈沖時間常數(shù)來控制電路電容的方法。對于方波脈沖,CE 模塊能提供傳送方波脈沖到低電阻介質(zhì)所需的大電容。
微生物系統(tǒng)由主單元、PC 模塊及 ShockPod 電擊槽組成,可電轉(zhuǎn)化細菌和真菌,或滿足其它需要在小體積高電阻樣品上施加高電壓脈沖的應(yīng)用。通過將電阻器與樣品并聯(lián)放置,PC 模塊可控制電路電阻,從而提供了一種減少指數(shù)衰變脈沖時間常數(shù)的方法。
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配套耗材:電擊杯
體積:200~800μL,最優(yōu)(350~400μL)
較寬的間隙以獲得低場強,用于哺乳動物和其他真核生物細胞。
體積:40~400μL,最優(yōu)(100μL)
窄間隙適用于高場強,可用于酵母菌、細菌和真核細胞。
體積:20~100μL,最優(yōu)(40μL)
最窄間隙和淺底適用于小樣品體積(40–80 μl) 以及超高場強,可用于酵母菌和細菌轉(zhuǎn)化。
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實驗方案數(shù)據(jù)庫
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